禽流感病毒ELISA檢測試劑盒說明書
【獸藥名稱】
通用名 禽流感病毒ELISA檢測試劑盒
商品名 無
英文名 Avian Influenza Virus ELISA Kit
漢語拼音 Qinliugan Bingdu Meilianmianyixifushiyan Jianceshijihe
【主要成分與含量】
（1）單抗包被板 封口膜應封閉良好，孔底應清潔透明，無異物，96孔/塊，1塊/盒。
（2）一抗（兔抗AIV-NP,白色蓋子） 應為無色透明液體，裝量10ml/瓶，1瓶/盒。
（3）羊抗兔IgG酶標抗體（藍色蓋子） 應為無色透明液體，裝量10ml/瓶，1瓶/盒。
（4）樣品處理液（白色蓋子） 應為無色透明液體，裝量100ml/瓶，1瓶/盒。
（5）陽性對照（紅色蓋子） 應為淡紅色透明液體，裝量1ml/管，1管/盒。
（6）陰性對照（藍色蓋子） 應為無色透明液體，裝量1ml/管，1管/盒。
（7）底物液A（紅色蓋子） 應為無色透明液體，裝量10ml/瓶，1瓶/盒。
（8）底物液B（黑色蓋子） 應為無色透明液體，裝量10ml/瓶，1瓶/盒。
（9）終止液（藍色蓋子） 應為無色透明液體，裝量10ml/瓶，1瓶/盒。
（10）20倍濃縮洗滌液（白色蓋子） 應為無色透明液體，裝量30ml/瓶，1瓶/盒。
（11）說明書 1份
【作用與用途】 用于檢測禽流感病毒（包括所有禽流感病毒亞型，但是不能區分）。
【用法與判定】
1 用法
1.1 樣品處理
1.1.1 雞胚尿囊液樣品處理 取一定量尿囊液按1:1加入等體積樣品處理液后，置36~38℃作用15分鐘，應間隔3~5分鐘混勻1次，以10000轉/分鐘離心30~60秒，取上清待檢。
1.1.2 內臟組織樣品處理 稱取內臟組織塊約1g,置勻漿器中，加入樣品處理液1ml,勻漿，凍融3次后，于36~38℃作用15分鐘，以10000轉/分鐘離心5分鐘，取上清待檢。
1.1.3 喉頭拭子和泄殖腔拭子樣品處理 用無菌棉拭子于禽類喉頭或泄殖腔中蘸取滲出液，然后浸泡于1ml樣品處理液中，劇烈震蕩1分鐘后，棄棉拭子，液體凍融3次后于36~38℃作用15分鐘，在2~8℃下以12000轉/分鐘離心5分鐘，取上清待檢。
1.2 取單抗包被板（根據樣品多少可拆開分次使用），將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水稀釋20倍后，每孔加入200?l稀釋好的洗滌液，靜置3分鐘后倒掉并在吸水紙上拍干。
1.3 加入待檢樣品，每孔100?l,同時設陰、陽性對照孔，每孔100?l,各1孔，置36~38℃作用30分鐘。
1.4 每孔加入200?l稀釋好的洗滌液，靜置3分鐘后倒掉并在吸水紙上拍干，共計洗滌5次。
1.5 加入一抗（兔抗AIV-NP），100?l/孔，置36~38℃作用30分鐘。
1.6 洗滌5次，方法同1.4.
1.7 加入羊抗兔IgG酶標抗體，100?l/孔，置36~38℃作用30分鐘。
1.8 洗滌5次，方法同1.4.
1.9 每孔加底物液A、底物液B各一滴（約50?l），混勻，室溫（20~25℃）避光顯色10分鐘。
1.10 每孔加入終止液一滴（約50?l），混勻后測定結果。
2 判定 在酶標儀上測各孔的OD630nm值。試驗成立的條件是：陽性對照孔的OD630nm值≥0.8,且≤2.0;陰性對照孔的OD630nm值<0.2.樣品OD630nm值>0.3時判為陽性；樣品OD630nm值≤0.3時判為陰性。
【注意事項】
（1） 各液體試劑使用前應充分搖勻。
（2） 不同批號試劑盒的試劑組份不能混用。
（3） 未使用的抗原包被板切記不要撕開上面的封口膜。
（4） 使用者應遵守國家有關禽流感疫情報告、病毒分離、無害化處理等相關法律、法規。
（5） 使用完畢后，將所有樣品、洗滌液和各種廢棄物都進行滅活處理。
【規格】 96孔/盒。
【儲藏與有效期】 2~8℃保存，有效期為6個月。
【批準文號】 獸藥生字（2007）170048092
【生產企業】 武漢科前動物生物制品有限責任公司